小鼠避暗儀的實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
熟悉環(huán)境：實(shí)驗(yàn)前2天使小鼠熟悉實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，自由飲食、攝水。
分組設(shè)計(jì)：按分層隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，使各組動(dòng)物平均體重和性別比例相似。實(shí)驗(yàn)小鼠按訓(xùn)練方法不同分為單次適應(yīng)單次電擊（MOS）、單次適應(yīng)限時(shí)訓(xùn)練（MOL）、多次適應(yīng)限時(shí)訓(xùn)練（MUL）3組，每組根據(jù)給藥不同分為對(duì)照（C）和模型（M）兩個(gè)亞組，最后共6組（每組n=9）。
儀器設(shè)置：避暗儀分為明、暗兩室，其間有一直徑為3cm的圓洞，兩室底部均鋪以銅柵。暗室底部銅柵可通電，電壓通過(guò)按鈕調(diào)節(jié)，一般為40V，50Hz。
訓(xùn)練方法
MOS法：訓(xùn)練在一天內(nèi)完成，先將小鼠放入避暗儀中適應(yīng)環(huán)境3min，訓(xùn)練時(shí)將小鼠背對(duì)洞口放入明室內(nèi)，其進(jìn)入暗室受到電擊即取出。
MOL法：訓(xùn)練在一天內(nèi)完成，小鼠適應(yīng)環(huán)境3min，訓(xùn)練3min。
MUL法：連續(xù)3天在同一時(shí)間將小鼠放入避暗儀中適應(yīng)3min，第三天適應(yīng)完成后開(kāi)始訓(xùn)練，3min后取出。適應(yīng)環(huán)境和訓(xùn)練時(shí)任小鼠在明室和暗室之間自由穿梭，步入潛伏期大于3min者棄去不用。
測(cè)試方法
記錄指標(biāo)：訓(xùn)練完成24h后將小鼠再次放入明室，記錄其第一次進(jìn)入暗室所需的時(shí)間，即步入潛伏期（STL）和5min內(nèi)進(jìn)入暗室的次數(shù)，即錯(cuò)誤次數(shù)（ETs）。若5min內(nèi)小鼠未進(jìn)入暗室則STL記為300s，ETs記為0。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)環(huán)境
環(huán)境清理：實(shí)驗(yàn)前后注意清理點(diǎn)擊柵欄動(dòng)物排泄物，排泄物會(huì)影響通電性。通過(guò)酒精擦拭、晾干盡可能去除上一只動(dòng)物氣味，儀器設(shè)備需具備通風(fēng)系統(tǒng)。
減少干擾：在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須保持所有實(shí)驗(yàn)程序一致，如屏蔽噪音、減少氣味刺激、調(diào)節(jié)光線(xiàn)等，實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)該安靜、昏暗，盡量輕巧抓取動(dòng)物，減少對(duì)動(dòng)物的刺激。關(guān)閉兩箱中間的門(mén)時(shí)要輕柔，不要制造過(guò)多外界的聲響影響動(dòng)物行為。
實(shí)驗(yàn)操作
動(dòng)物適應(yīng)：實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前3-7天，每天抓取、輕撫動(dòng)物，讓其適應(yīng)被實(shí)驗(yàn)人員抓取，避免實(shí)驗(yàn)過(guò)程中因?qū)嶒?yàn)人員抓取而造成動(dòng)物處于應(yīng)激狀態(tài)，造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果不可靠的問(wèn)題。
電擊參數(shù)：大鼠電流為0.65-1.8mA（推薦0.8mA），或電壓65-70V；小鼠電流為0.15-0.6mA（推薦0.25mA），或電壓30-36V，頻率為5-15Hz電流。
設(shè)備維護(hù)：實(shí)驗(yàn)儀器底部的銅柵容易生銹，導(dǎo)致電阻增加，每次實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)以砂紙打磨光滑。
